用于分子生物学研究的样本主要为RNA和DNA,其中RNA需要比DNA更严格的贮存条件,主要原因是RNA非常不稳定,而催化RNA降解的RNase非常稳定又无处不在。目前,有许多商业的RNA样本储存管和试剂可供选择,以帮助科研工作者储存和运输RNA样本。下面,小编就为大家介绍几种最常用的RNA样本储存试剂,希望能对大家的样本收集和储存工作有所帮助。
(一)RNAlater液态组织保存试剂
RNAlater是一种液态、无毒的组织保存试剂。它能迅速渗入新鲜组织,保护非冷冻细胞RNA于原位。使用时注意:1)RNAlater应室温保存,保质期6个月。如放置在4℃或冷冻条件下则会引起沉淀,此时需加热到37℃才可澄清。2)RNAlater可广泛应用于各类新鲜组织,包括脑、心、肾、脾、肝、睾丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺等。3)组织放置入RNAlater前,切勿冻存!
操作步骤:
(二)PAXgene®血液 RNA 试管
PAXgene®血液RNA管内含稳定体内基因转录性状的添加剂,可以快速的保护细胞内的RNA不被降解。该管可常温保存3天,2-8度保存5天,-20℃或-70℃保存8年。
(图片来往于BD公司的产品介绍文件)
操作步骤:
(三)Trizol / Trizol LS
Trizol 适用于从组织和细胞中提取总RNA, DNA和蛋白。每1 ml试剂可用于100mg组织或10 7 个细胞的总RNA提取,室温保存,性价比最高。TRIzol LS Reagent是一种专门用于从液体样本(如细菌、病毒、酵母、血液、组织悬液)中提取高质量RNA的试剂。与TRIzol Reagent相比,唯一区别在于其组分浓度,TRIzol LS Reagent 是一种用于提取液体样本RNA的浓缩试剂,故提取相同量样本所需的用量相对较少。TRIzol LS Reagent能够充分裂解细胞,溶解细胞内含物,高效抑制RNA酶活性,从而可保持RNA的完整性。
操作步骤:
通过上述的介绍,大家会发现一种生物标本可能有好几种RNA保存方法,那么,到底应该选择哪一种方法最佳呢?
不要着急,
小编依据公司多年的项目经验,
为您整理了多种类型样本的RNA保存和运输方法,
方便您的查阅。